2011年药学专业知识二辅导:胰岛素粗制提取品
来源:网络 2010年12月24日
导读: 胰岛素粗制提取品:除去结缔组织等杂质,绞碎成冰胰浆。
将新鲜或冰冻猪胰(牛胰更好)除去结缔组织等杂质,绞碎成冰胰浆。称重量置提取罐中,加入1.5~2.0倍量的酸性酒精溶液,使PH为2.5~3.0,醇含量为70%左右,在温度为13~150C搅拌提取3h,压滤,使浸液尽量滤出。残渣再用上法提取一次。合并二次浸出液,放碱化罐中,在10~150C下加入氨水,使pH达8.2~8.4,拌搅35/min立即压滤,于澄清的滤液中迅速加入24mol/L硫酸使pH调至2.5~3.0。在0℃左右放置过夜使酸性杂蛋白沉降,分取清液,真空浓缩(300C以下),使浓缩液量到原体积1/7~1/9,将浓缩液在10min之内迅速加温至500G立即用冰冷却至0℃,放置3h,将上层脂肪分离(回收胰岛素),澄清的浓缩液,调pH达2.5,在20~250C下搅拌加入溶液容积25%的精盐,使全部溶解,置冷处放置3~4h沉淀,用绢布滤集沉淀,再用无水丙酮洗涤数次(除去剩余的脂肪和水),300C以下真空干燥得粗制品。
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