药物分析辅导：葛根芩连丸含量测定方法

　　葛根芩连丸（葛根芩连微丸）处方为：葛根1000g，黄芩375g，黄连375g，炙甘草250g。
    2005《中国药典》葛根芩连丸含量测定项下：
    色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-乙腈-水（6：8：86）为流动相；检测波长为250nm。理论板数按葛根素峰计算应不低于3000。
    供试品溶液的制备：取装量差异项下的本品，研细，取约0.3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
    文献报道的一般以葛根素为含量测定的指标，如：
    戚雪勇等用HPLC法测葛根芩连微丸中黄芩苷含量。仪器：日本岛津HPLC-10A系列。色谱柱为C18柱(250mm×4mm,10μm)；流动相：甲醇-水-四氢呋喃 (THF)(45：55：6)(水为pH=2.7的磷酸水溶液)；流速1ml/min；柱温15℃；检测器波长280nm。样品用40%甲醇超声处理。
    张科卫等用HPLC双波长法测定葛根芩连微丸中葛根素、黄芩苷的含量。仪器：Waters515型高效液相色谱仪。色谱柱为Kromasil C18柱(4.6mm×250mm, 5μm)；以甲醇（A）-0.2%磷酸（B）为流动相，梯度洗脱：0min：A35%，B65%，8minA35%，B65%，10minA48%， B52%，26minA48%，B52%，28minA35%，B65%，35min A35%，B65%。检测波长λ1=250nm(检葛根素)，λ2 =315nm(检黄芩苷)，柱温30℃，流速1.0mL/min。样品用甲醇超声处理。
    吴昭晖等用HPLC法测定葛根芩连微丸中葛根素的含量。仪器：HP-1100 高效液相色谱仪。色谱柱为ODS柱(5μm, 250mm×4mm)；流动相为甲醇-乙腈-水(12：8：80)；柱温为室温；检测波长为250nm；流速0.8ml/min。样品用甲醇回流提取。
    夏宏用薄层扫描法测定葛根芩连微丸中葛根素的含量。薄层条件：硅胶G，展开剂为氯仿-甲醇-水（60：35：10）下层溶液。扫描条件：λR=256nm，λS= 360nm，SX=3，狭缝1.2×1.2nm，反射法线性扫描；光源D2灯。样品用无水乙醇超声提取后用中性氧化铝柱处理。
其它，如：盐酸小檗碱：徐英瑜等用二阶导数光谱法测定葛根芩连微丸中盐酸小檗碱的含量。样品用无水乙醇回流提取。测定条件：波长范围300～450nm，狭缝2nm，Δλ=2nm，吸收度范围-0.1～0.1，扫描速度40nm/cm。