药物分析辅导：龙胆泻肝丸含量测定方法

    龙胆泻肝丸处方为：龙胆120g，柴胡120g，黄芩60g，栀子（炒）60g，泽泻120g，木通60g，车前子（盐炒）60g，当归（酒炒）60g，地黄120g，炙甘草60g。
    2005《中国药典》龙胆泻肝丸含量测定项下：
    色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（23：77）为流动相；检测波长为270nm，柱温40℃。理论板数按龙胆苦苷峰计应不低于2500。
    供试品溶液的制备：取本品，研细，取约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理（功率250W，频率33kHz）45分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
    文献报道的方法，以黄芩苷为指标的，常用的实验条件如：李楚云等用HPLC法测定龙胆泻肝丸中黄芩苷的含量，采用Waters 515高效液相色谱仪，色谱柱为Nova-Pak C18 (3.9mm×150mm,4μm)，流动相为甲醇-水-冰醋酸（50：50 ：1），流速1.0ml/min，检测波长279nm。样品用50%甲醇超声提取，结果黄芩苷在1.60～7.60μg/ml 范围内线性良好，平均回收率为99.0%，RSD为2.2%。
    丘桂贤等用HPLC法测定龙胆泻肝丸中黄芩苷的含量，采用LC-10AD高效液相色谱仪，色谱柱为Shimpack C18(6.0mm×150mm)，流动相为磷酸二氢铵溶液(取磷酸二氢铵2.88，加水溶解成
1000ml，并以80%磷酸调节pH为3.0)-甲醇(40：60)，流速1.00ml/min,检测波长279nm。
    颜耀东等用聚酰胺薄层扫描法测定龙胆泻肝丸中黄芩苷的含量，聚酰胺用85%甲酸和70%乙醇处理，展开剂为36%醋酸-水（10：0.9）。Λs=280nm，λR=210nm。
    黄淑彰等用紫外分光光度法测定龙胆泻肝丸中黄芩苷的含量，测定吸收波长为277nm。
    以龙胆苦苷为指标的，如：许军等用HPLC光电二极管矩阵检测器测定龙胆泻肝丸中龙胆苦苷的含量，采用Waters高效液相色谱仪，YWG C18柱，流动相为甲醇-水-乙腈（1：4：2），检测波长为270nm。
     另外还有以马兜铃酸和栀子苷为指标的，如：付桂香等用薄层扫描法测定龙胆泻肝丸中马兜铃酸的含量，薄层板为Silica gel 60 F254预制板，苯-甲醇-36%醋酸（17：2：0.2）为展开剂。双波长反射法锯齿扫描，λS=395nm，λR=500nm。李红霞用RP- HPLC法测定龙胆泻肝丸中栀子苷的含量，色谱柱为Shimadzu ODS 柱(150mm×4.6mmID,5μm)，流动相为异丙醇-醋酸乙酯-水(1：0.8：92.2)，流速1.5ml/min，柱温40℃。