执业药师考前辅导——药物分析[2]

第六章  分光光度法 
第一节  紫外可见分光光度法 
一、基本原理 
紫外--可见分光光度法：是根据物质分子对波长为200-760nm这一范围的电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法。操作简单、准确度高、重现性好。 
波长长(频率小)的光线能量小，波长短(频率大)的光线能量大。 
        100nm   200nm      400nm         800nm         400um       1m 
                      通指 
X-射线          紫外区            可见区           红外区       微波区     无线电波区 
Beer-lambert定律： A=E l c   A--吸收度   E-吸收系数  l ---液层厚度   c---溶液浓度 
吸收度浓度与厚度的关系。是吸收光度法的基本定律，重要前提是单色光。 
摩尔吸收系数：指在一定波长下，溶液浓度为1mol/L , 厚度为1cm时的吸收度，用  表示。 
百分吸收系数：指在一定波长下，溶液浓度为1%(W/V) , 厚度为1cm时的吸收度，用   表示。 
影响Beer定律因素：化学因素，光学因素 
二、紫外--可见分光光度计：  主要部件： 
1、 光源：要求光谱的光源，2、 氢灯和钨灯(350nm) 
3、 单色器：进口狭缝、准直镜、色散元件(棱镜和光栅)、聚焦透镜和出口狭缝组成。 
4、 吸收池：用光学玻璃制成的吸收池，5、 只能用于可见光区。用熔融石英(氧化硅)，6、 可见紫外光区。 
7、 检测器：光电池：(硒光电池：用于可见光；硅光电池：紫外可见光) 内阻小，8、 易疲劳。 
             光电管：内阻高，电流易放大 。 
9、 讯号处理和显示器 
三、定性与定量方法： 
  (一)、定性鉴别：是多数有机化合物具有吸收光谱特征。一般用对比法。 
1、对比吸收光谱特征数据  2、对比吸收度(或吸收系数)比值  3、对比吸收光谱的一致性 
  (二)、纯度检查：杂质检查与杂质限量检测 
  (三)、含量测定： 
       1、吸收系数法   2、标准曲线法    3、对照法  
第二节   荧光分析法 
荧光分析法：利用荧光的物理特性而进行定性与定量测定的方法。荧光法比紫外可见灵敏。 
荧光光度计：激发光源、样品池、检测器、滤光片和单色器。 
第三节  红外分光光度计 
红外线：波长大于0.76um，小于500um的电磁波。  Hooke定律来描述分子的伸缩振动。 
当分子的振动频率与入射的红外频率相同时，分子对红外产生吸收。伸缩振动和弯曲振动。 
基频峰：分子吸收一定频率的红外线，振动能级由基态(V=0)跃迁至第一激发态时产生的吸收峰。 
倍频峰：振动能级由基态跃至第二、三激发态。统称泛频峰。 
吸收峰：用于鉴别官能团存在的吸收峰称特征吸收峰。 
指纹区：1250-400cm (8.0-25um)的低频区称为指纹区。 
红外分光光度计主要部件：光源、吸收池、单色器(棱镜和光栅)和检测器(真空热电偶)及记录装置。  

第七章  色谱法 
第一节  概述 
色谱法：是一种物理或物理化学分离方法。用于定性鉴别、纯度检查、含量测定。 
分配系数：组分在固定相和流动相之间的分配平衡时的浓度之比。 K= 
容量因子：又称质量分配系数，即达到分配平衡后，组分在固定相和流动相中的质量之比。  
第二节  薄层分析法 
一般指吸附薄层色谱法，固定相为吸附剂的薄层吸附法。K值越大随展开剂移动的速度越慢。 
比移徝：在薄层色谱法中，组分的迁移距离(  )与展开剂的迁移距离(  )之比称为比移值(  ) 。 
       R  最佳范围是0.3-0.5 ，可用范围是0.2-0.8 。 
吸附剂：吸附薄层色谱法的固定相。常用吸附剂有：硅胶、氧化铝、硅藻土、纤维素和聚酰胺。 
  硅胶：在105-110 C加热30分，使硅胶吸附力增加，称为活化。具微酸性，适分离酸性中性物质。 
  氧化铝：碱性、中性、酸性。中性用得多。 
制备薄层板：要求吸附剂涂布均匀表面光滑，使用前检查均匀度。2000版用机械涂布法。活化。 
吸附剂与展开剂的选择：分离极性较强的组分时，宜选用活性低(活度级别高)的薄层板，以极性强的展开剂展开。反之 
点样：体积宜在20ul 以下，样径不超过2-3mm ，点间距离为1.5-2.0cm，距底2.0cm 。 
显色方法：直接喷雾法、浸渍法、压板法。 
 定性分析方法、纯度检查、定量分析方法(洗脱测定法和直接测定法)。 
第三节  气相色谱法 
气相色谱法：以气体为流动相的色谱法称为气相色谱法。不适用于难挥发和热稳定性差的物质分析。 
原理：各组分在固定相与载气(流动相)间分配系数不等，按大小依次被载气带出色谱柱，小先流出。 
一、基本原理： 
(一)、基本概念： 
一个组分的色谱峰用三项参数：峰高或峰面积(用于定量)、峰位(用保留值表示，用于定性)、峰宽(用于衡量柱效)。 
(1)、保留时间 (tR) ：从进样开始到某个组分的色谱峰顶点的时间间隔。 
(2)、死时间 (t0)：分配系数为零的组分的保留时间。 
(3)、相对保留值 (r)：两组分的调整保留值之比。 
(4)、半峰宽 (Wh/2)：峰高一半处的峰宽。