☆ ☆☆☆☆考点4：盐酸吗啡的分析
1．结构及性质
盐酸吗啡属异喹啉类生物碱，分子中含有酚羟基和叔胺基团，属两性化合物，但碱性略强。其结构为：
2．鉴别
（1）与甲醛-硫酸试液的反应。系吗啡生物碱的特征反应。取盐酸吗啡约1mg，加甲醛硫酸试液1滴，即显紫堇色。
（2）与钼硫酸试液的反应。也是吗啡生物碱的特征反应。取盐酸吗啡约1mg，加钼硫酸试液0.5ml，即显紫色，继变为蓝色，最后变为棕绿色。
（3）与铁氰化钾试液的反应。吗啡具弱还原性。其水溶液加稀铁氰化钾试液，吗啡被氧化生成伪吗啡，而铁氰化钾被还原为亚铁氰化钾，再与试液中的三氯化铁反应生成普鲁士蓝。
4C17H19NO3＋4K3Fe（CN）6→H4Fe（CN）6＋2C34H35N2O6＋3K4Fe（CN）6
3K4Fe（CN）6＋4FeCl3→Fe4[Fe（CN）6]3＋12KCl
可待因无还原性，不能还原铁氰化钾，故此反应为吗啡与可待因的区分反应。
（4）红外光谱法。除以上显色反应外，《中国药典》采用红外光谱法鉴别本品，为避免离子交换采用KCl压片法，特征吸收峰如下表：
《中国药典》规定，本品的红外吸收光谱应与对照的图谱一致。
（5）Cl-的反应。本品的水溶液显氯化物的鉴别反应。照《中国药典》附录“一般鉴别试验”中“氯化物”的鉴别方法试验。
3．特殊杂质检查
（1）阿扑吗啡的检查。吗啡在酸性溶液中加热，可以脱水，经分子重排，生成阿扑吗啡。如含有阿扑吗啡，其水溶液在碳酸氢钠碱性条件下，经碘试液氧化，生成水溶性绿色化合物，此产物能溶于乙醚，显深宝石红色，水层仍显绿色。规定50mg药物经检查醚层和水层不得显色。
（2）罂粟酸的检查。阿片中含有罂粟酸，在提取吗啡时，可能引入。罂粟酸在微酸性溶液中遇三氯化铁生成红色的罂粟酸铁。取本品0.15g，加水5ml溶解后，加稀盐酸5ml与三氯化铁2滴，不得显红色。
（3）其他生物碱的检查。“其他生物碱”指除吗啡以外，在提取过程中可能带人的生物碱，如可待因、蒂巴因、罂粟碱、那可汀等。《中国药典》规定照薄层色谱法检查，
检查方法：取本品0.1g，加乙醇-水（1：1）10ml使溶解，作为供试品溶液。另取磷酸可待因对照品50mg，溶于5ml供试品溶液中，取上述溶液0.1ml加乙醇-水（1：1）稀释至10ml，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各20μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以70%乙醇-甲苯-丙酮-浓氨溶液（35：35：32.5：2.5）为展开剂，展开，晾干，喷以碘化铋钾试液，放置15分钟，再喷以过氧化氢试液显色。供试品溶液如显可待因斑点，与对照品溶液的可待因斑点比较，不得更深；如显其他杂质斑点，其颜色不得较对照品溶液所显的吗啡斑点更深。
本法用磷酸可待因作对照，检查吗啡中的可待因，另用高低浓度对比法检查其他生物碱，限度均为1%。
4．含量测定
（1）盐酸吗啡的含量测定。《中国药典》测定盐酸吗啡含量时使用了非水溶液滴定法。
测定方法：取吗啡0.2g，精密称定，加冰醋酸10ml与醋酸汞试液4ml溶解后，加结晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定，至溶液显绿色，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的高氯酸滴定液（0.1mol/L）相当于32.18mg的C17H19NO3•HCl。
为消除盐酸对滴定的影响，在滴定前先加入醋酸汞试液4ml。本法中1mol的HClO4相当于1mol的盐酸吗啡，无水盐酸吗啡的分子量为321.80，因此1ml的高氯酸滴定液（0.1mol/L）相当于32.18mg的盐酸吗啡（C17H19NO3•HCl）。
（2）盐酸吗啡片的含量测定。盐酸吗啡结构中有苯环，其氢氧化钠水溶液在250nm波长处有最大吸收。《中国药典》采用紫外分光光度法测定盐酸吗啡片的含量。
测定方法：取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于盐酸吗啡10mg），置100ml量瓶中，加水50ml振摇，使盐酸吗啡溶解，再加水至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液15ml，置50ml量瓶中，加0.2mol/L。氢氧化钠溶液25ml，再加水至刻度，作为供试品溶液；另精密称取在105℃干燥1小时的吗啡对照品适量，用0.1mol/L的氢氧化钠溶液配制成每1ml约含20μg的溶液，作为对照品溶液。取上述两种溶液，在250nm波长处测定吸收度，计算，即得。含量测定结果的计算公式为：
式中，AX，AR--供试品溶液和对照品溶液的吸收度；CR--对照品溶液的浓度，μg/ml；W--样品的称样量，g； --平均片重，g；1.317为换算因数，因使用的是吗啡对照品，而结果按盐酸吗啡计算，1.317为盐酸吗啡的分子量和吗啡分子量的比值。
☆ ☆☆考点5：硝酸士的宁的分析
1．结构及性质
士的宁分子中含有两个碱性强弱不同的氮原子，处于脂肪族碳链上的氮原子碱性较强，故士的宁碱基与一分子硝酸成盐。其结构如下：
2．鉴别
（1）与重铬酸钾的反应。取硝酸士的宁约0.5mg，置蒸发皿中，加硫酸1滴溶解后，加重铬酸钾的结晶一小粒，周围即显紫色。
（2）NO3-的反应。本品的水溶液显硝酸盐的鉴别反应，照《中国药典》附录“一般鉴别试验”中“硝酸盐”的鉴别方法试验。硝酸具有氧化性，因此，利用其与亚铁离子和铜丝的反应可鉴别它的存在。同时它不能被高锰酸钾氧化，可与亚硝酸盐区分。
①取供试品溶液，置试管中，加等量的硫酸，注意混合，冷后，沿管壁加硫酸亚铁试液，使成两液层，接界面显棕色。
NO3-被Fe2+还原成NO，NO与FeSO4作用形成棕色。
②取供试品溶液，加硫酸与铜丝（或铜屑），加热，即发生红棕色的蒸气。
HNO3-被金属铜还原产生NO，NO进一步被空气中的氧氧化成NO2而显棕色。
③取供试品溶液，滴加高锰酸钾试液，紫色不应褪去（与亚硝酸盐区别）。
3．特殊杂质检查
硝酸士的宁中马钱子碱的检查：马钱子碱经硝酸与水的等容混合液作用后，得红色或淡红棕色的硝化产物。取本品0.1g，加硝酸与水的混合液1ml，除黄色外，不得显红色或淡红棕色。
4．含量测定
（1）硝酸士的宁的含量测定。士的宁有弱碱性，《中国药典》采用非水溶液滴定法测定含量。滴定产物硝酸在冰醋酸介质中虽为弱酸。但它具有氧化性。可以破坏指示剂。所以采用电位法指示终点。
测定方法：取本品约0.3g，精密称定，加冰醋酸20ml，振摇使溶解，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定，以电位法（玻璃-饱和甘汞电极系统）指示终点。每1ml的高氯酸滴定液相当于39.74mg的C21H22N2O2•HNO3。
（2）硝酸士的宁注射液的含量测定。硝酸士的宁具有苯环结构，其水溶液在254nm波长处有最大吸收，《中国药典》采用紫外分光光度法测定硝酸士的宁注射液的含量。
测定方法：取本品适量，加水制成每1ml中约含16μg溶液，在254nm波长处测定吸收度，按硝酸士的宁的吸收系数（E1%1cm）为316计算，即得。
含量测定结果的计算公式为：
式中，A--测得的吸收度值；D--稀释倍数；V--供试品的取用量，ml。
