碱催化水解主要用于酚苷、酯苷、烯醇苷及苷键β-位有吸电子基，如羰基、羧基。这些苷键有酯的性质，遇碱可以发生水解，β-位有吸电子基使α-氢活化，碱液中易与苷键起消除反应使苷键裂解。
脂肪族苷元和糖形成的苷对碱稳定。
·酶催化水解
酶催化水解的特点是专属性很强、条件温和。
常用的酶： 麦芽糖酶 ───── 选择性地水解α-葡萄糖苷键
苦杏仁苷酶 ──── 水解一般的β-葡萄糖苷键和有关的六碳醛糖苷
转化糖酶 ───── 水解β-果糖苷键
纤维素酶 ───── 水解β-葡萄糖苷键
芥子苷酶 ───── 水解芥子苷
有些酶的水解反应与pH有关，如芥子苷酶水解芥子苷时，pH7或弱酸时，生成的产物为糖和异硫氰酸酯，而在pH3～4时酶解则生成腈和糖。
有些低聚糖苷由于组成糖链的糖的种类不同，可采用混合酶，常用的混合酶有粗橙皮酶、高淀粉酶、粗柑橘苷酶或以上这些酶的混合物。
·乙酰解反应
乙酰解是以CH3CO+（Ac+）为进攻基团，其开裂苷键的难易有与酸水解相似之处，如五碳糖苷键比六碳糖苷键易开裂。但也有与酸水解不同之处。苷键乙酰解难易与其邻位是否有可乙酰化的羟基有关，如果在苷键的邻位有羟基，可使乙酰解的速度降低。
乙酰解的试剂：乙酸酐与不同酸的混合液。
苷键乙酰解在双糖中一般规律为: 1-6键＞1-4键＞1-3键＞1-2键。
乙酰解可用于多糖苷的结构研究中，糖与糖连接位置的确定。
