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第3章 中药化学成分与药效物质基础
知识点预习：常用的分离与精制方法
1、根据溶解度差别进行分离
（1）利用温度不同引起溶解度的改变进行分离：常用结晶与重结晶。
结晶纯度的判断：
形态和色泽：晶形和色泽均匀；
熔点和熔距：熔距1-2℃之间；
色谱分析：不同的系统条件，均为单一斑点；
高效液相；质谱和核磁共振。
（2）利用两种以上不同溶剂的极性和溶解性差异进行分离
水提醇沉：沉淀蛋白质、多糖；
醇提水沉法：沉淀除去树脂、叶绿素；
醇-醚/丙酮法：沉淀皂苷。
（3）利用酸碱性进行分离
酸碱沉淀法分离生物碱、黄酮；调节pH值，利用等电点沉淀蛋白质。
（4）沉淀法
酸碱沉淀法：如，生物碱、黄酮；
试剂沉淀法：如，皂苷用丙酮或乙醚沉淀，生物碱雷氏盐沉淀法等；
酸性化合物：钙、钡、铅盐等。
2、根据物质在两相溶剂中的分配比不同进行分离
（1）液－液萃取法：分配系数K不同而达到分离的方法。用分离因子β=KA/KB表示，β越大越易分离。
（2）液－液萃取与纸色谱（PC）
（3）液－液分配柱色谱
正相色谱：固定相的极性大于流动相；分离水溶性和极性较大的化合物（如生物碱、苷类、糖类、有机酸等化合物）时。
反相色谱：固定相的极性小于流动相；分离脂溶性化合物。
3、根据物质的吸附性差别进行分离
（1）物理吸附（表面吸附）：
1）极性吸附剂
硅胶：适用分离的化合物范围广泛，但不宜分离碱性化合物。
氧化铝：适于分离碱性成分，不宜分离醛、酮、酯和内酯。
2）非极性吸附剂
活性碳：对非极性物质有较强的亲和能力。应用脱色、脱臭。
3）大孔吸附树脂
原理： 即具有吸附性，又具有筛选性分离的特点。
应用：分离和富集，适于分离水溶性化合物（糖、苷、生物碱等）；工业废水，废液的净化处理。
洗脱液的选择：
水洗：单糖、鞣质、低聚糖、多糖等极性物质；
70%乙醇洗：皂苷，少量酚、糖及黄酮；
3%-5%碱液洗：黄酮、有机酸、酚类和氨基酸；
10%酸洗：生物碱、氨基酸；
丙酮洗：中性亲脂性成分。
（2）化学吸附：黄酮等酚酸性物质被碱性氧化铝吸附，或生物碱被酸性硅胶吸附。
（3）半化学吸附：聚酰胺吸附
原理：聚酰胺中的酰胺基可与酚羟基、羧基、羰基等形成氢键吸附。
对聚酰胺柱的洗脱能力：尿素＞二甲基甲酰胺＞甲酰胺＞氢氧化钠水＞丙酮＞甲醇、水。应用：分离酚类、黄酮类、脱鞣质。
4、根据物质分子大小差别进行分离
（1）凝胶过滤色谱法
常用的有葡聚糖凝胶（sepHadex G）,及羟丙基葡聚糖凝胶（SepHarese LH-20）等。葡聚糖凝胶只适于在水中应用。羟丙基葡聚糖凝胶适于不同类型的有机物的分离。在水中不溶，可膨胀。
分离原理：根据分子量大小，大分子物质首先被洗出。常用透析法除无机盐。
（2）膜过滤法：以外界能量或化学位差为推动力，对多组分进行分离、分级、提纯或富集。主要技术：渗透、反渗透、超滤、电渗析、液膜技术。常用透析法除无机盐。
5、根据物质的解离程度不同进行分离
（1）离子交换色谱法
适于可离子化的物质的分离。如：氨基酸、生物碱、有机酸和酚类。
阳离子交换树脂：强酸性：-SO3-H+(分离生物碱)、弱酸性（-COO-H+）。
阴离子交换树脂：强碱性：-N+（CH3）3CL-（分离有机酸）、弱碱性。
应用：可离子化的成分，分离不同电荷离子，相同电荷的离子；对离子型化合物和非离子型化合物进行分离。
6、根据物质的沸点进行分离
分馏法是利用中药中各成分（液体）沸点的差别进行提取分离的方法。
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