质量标准——中药质量标准分析方法验证指导原则2

　　三、专属性

　　专属性系指在其他成分可能存在下，采用的方法能正确测定出被测成分的特性。鉴别、限量检查、含量测定等方法，均应考察其专属性。

　　1.鉴别

　　应能与可能共存的物质或结构相似化合物区分。不含被测成分的供试品，以及结构相似或组分中的有关化合物，均不得干扰测定，显微鉴别、色谱光谱鉴别等应附相应的代表性图象或图谱。

　　2.含量测定和限量检查

　　色谱法和其他分析方法，应附代表性图谱，以不含被测成分的供试品（除去含待测成分药材或不含待测成分的模拟复方）试验说明方法的专属性。并标明相关成分在图中的位置，色谱法中的分离度应符合要求。必要时可采用二极管阵列检测或质谱检测进行验证。

　　四、检测限

　　检测限系指供试品中被测物能被检测出的最低量。确定检测限常用的方法如下。

　　1.直观法

　　可用于非仪器分析方法，也可用于仪器分析方法。

　　用一系列已知浓度的供试品进行分析，试验出能被可靠地检测出的最低浓度或量。

　　2.信噪比法

　　仅适用于能显示基线噪音的分析方法，即把已知低浓度供试品测出的信号与空白样品测出的信号进行比较，算出能被可靠地检测出的最低浓度或量。一般以信噪比为3∶1或2∶1时相应浓度或注入仪器的量确定检测限。

　　3.数据要求

　　应附测试图谱，说明测试过程和检测限结果。

　　五、定量限

　　定量限系指供试品中被测成分能被定量测定的最低量，其测定结果应具一定准确度和精密度。用于定量测定的分析方法均应确定定量限。

　　常用信噪比法确定定量限。一般以信噪比为10∶1时相应的浓度或注入仪器的量进行确定。

　　六、线性

　　线性系指在设计的范围内，测试结果与供试品中被测物浓度直接呈正比关系的程度。

　　应在规定的范围内测定线性关系。可用一贮备液经精密稀释，或分别精密称样，制备一系列供试样品的方法进行测定，至少制备5个浓度的样品。以测得的响应信号作为被测物浓度的函数作图，观察是否呈线性，再用最小二乘法进行线性回归。必要时，响应信号可经数学转换，再进行线性回归计算。

　　数据要求：应列出回归方程、相关系数和线性图。

　　七、范围

　　范围系指能达到一定精密度、准确度和线性，测试方法适用的高低限浓度或量的区间。

　　范围应根据分析方法的具体应用和线性、准确度、精密度结果及要求确定。中药由于含量差异大，对于有毒的、特殊功效或药理作用的成分，其范围应大于被限定含量的区间。溶出度或释放度中的溶出量测定，范围应为限度的±20%.

　　八、耐用性

　　耐用性系指在测定条件有小的变动时，测定结果不受影响的承受程度，为把方法用于常规检验提供依据。开始研究分析方法时，就应考虑其耐用性。如果测试条件要求苛刻，则应在方法中写明。典型的变动因素有：被测溶液的稳定性，样品提取次数、时间等。液相色谱法中典型的变动因素有：流动相的组成和pH值，不同厂牌或不同批号的同类型色谱柱，柱温，流速等。气相色谱法变动因素有：不同厂牌或批号的色谱柱、固定相，不同类型的担体、柱温，进样口和检测器温度等。薄层色谱的变动因素有：不同厂牌的薄层板，点样方式及薄层展开时温度及相对湿度的变化等。

　　经试验，应说明小的变动能否通过设计的系统适用性试验，以确保方法有效。

附表检验项目和验证内容

　　①已有重现性验证，不需验证中间精密度。

　　②重现性只有在该分析方法将被法定标准采用时做。

　　③如一种方法不够专属，可用其他分析方法予以补充。

　　上表中列举了在不同类型的分析方法验证中被认为是最重要的项目，“-”表示通常不需要验证的项目，“+”表示通常需要验证的项目，如遇特殊情况，仍应根据具体分析对象和情况而定。