天然药物集——冬虫夏草:药材鉴别(理化鉴别)
理化鉴别
1. 取样品粉末1g,用乙醚溶出杂质后,用氯仿提取,滤过,滤液挥去氯仿,滴加冰醋酸2滴,再加乙酸酐2滴,最后加浓硫酸1~2滴。冬虫夏草显棕黄色→红紫色→污绿色;亚香棒虫草显棕黄色→紫色→墨绿色。(检查甾醇类)
2. 将上述经氯仿提取过的粉末,再用20%乙醇回流提取,并浓缩至适量。
⑴取浓缩液0.5ml,用蒸馏水稀释至2~3ml,先加40%氢氧化钠溶液2ml,振摇,然后加1%硫酸考试,大收集整理铜试剂数滴(不可加过量,以免掩盖颜色),振摇,溶液逐渐变为紫红色。冬虫夏草呈弱颜色反应;亚香棒虫草呈较强的颜色反应。(检查蛋白质)
⑵取浓缩液0.5ml,稀释至1ml,加稀盐酸数滴,再加碘化铋钾试液数滴,放置10分钟后,产生黄色絮状沉淀。在另一支试管中,同上操作后,滴加碘-碘化钾试液,产生混浊。(检查生物硷)
3. 薄层层析。样品制备:见2。
⑴检查腺嘌呤、尿嘧啶等成分:吸附剂I:硅胶GF254,以0.5mol/L磷酸氢二钠制板。展开剂:氯仿-乙酸乙酯-异丙醇-水(8:2:6:0.4:0.8),用时,每10ml中加浓氨水2滴。展距18.7cm.在紫外光灯(254nm)下,斑点呈紫色。(图左)
⑵检查甘露醇:吸附剂II:硅胶G,用0.3M硼酸制板。展开剂:正丁醇-乙酸-水(2:1:1)。展距:17.6cm.显色剂:a.0.1%高碘酸钾。b.0.5%联苯胺醇液。将a稀释5倍,喷于板上,将板烘干,再喷洒b液,则在蓝色背景中呈白色斑点。(图右)
图左:冬虫夏草薄层层析图谱
S:a.尿苷 b.腺苷 c.腺嘌呤 d.尿嘧啶1. 冬虫夏草(四川) 2.亚香棒虫草(湖南)
图右:冬虫夏草薄层层析图谱
S:D-甘露醇 1.冬虫夏草 2.亚香棒虫草(湖南)