(四十五)还原糖反应来源:考试大
取碱性酒石酸铜试液,加放供试品,缓缓加热,即生成氧化亚铜的红色沉淀。
CuSO4+2NaOH→Cu(OH)2+Na2SO4
葡萄糖、果糖及水解邱的乳糖和丁均呈此反应。其它如维生素C及含有20一酮一21羟基甾体(如化泼尼松、氟美松、氟氢可的松及肤因松等),因其具有还原性,亦有此反应。
(四十六)氨基酸、肽类、蛋白质纸层析呈色反应。
用0.2%茚三酮乙醇溶液鉴别,反应灵敏,层析滤纸等不宜用手指多接触,亦不宜与氨气接触,否则纸背呈红色。
茚三酮不仅与α氨基酸作用,也与某些β氨基酸和伯、仲脂肪胺等作用,生成相似的有色物质。对脂肪族叔胺或芳无作用。对多肽也能显色,但肽越大度越低。吲哚醌试剂也有相似作用,其灵敏度不及茚三酮高。但对不同氨基显不同色调。
茚三酮反应原理:对α氨基酸先起氧化,脱氨化应之分解成氨,二氧化碳和醛,茚三酮本身被还原,再与生成的氨缩合成紫色物质。
吲哚醌与α氨基酸反应:对辅氨酸、组氨酸呈蓝色;对色氨酸、甲硫氨基酸呈绿色;对亮氨酸、丝氨酸呈红色等。对一些小肽也能显色,但肽越大灵敏芳越低,色差也小,接近黄色。
(四十七)甾体类、三萜类
甾体类、三萜类的显色剂,均属酸类,其中有强酸如硫酸、磷酸、氯磺酸高氯酸、三氟乙酸;中等强度的酸如三氯乙酸,也有三氯化锑、二氯化锌等Lewis氏酸。
挥发油属萜类,若油斑未消失前,喷5%香蓝醛的浓盐酸试液后,可呈现黄、红、蓝等色。油脂无此反应。
试剂 | 一 | NH3 | AICI3 | Na2CO3 | |||||
光线 | ViS. | U.V | ViS. | U.V | ViS. | U.V | ViS. | U.V | |
化 合 物 |
黄酮 | 淡黄 | 暗棕、红棕、黄棕 | 黄 | 亮黄 | 淡黄 | 亮黄 | ||
黄酮醇 | 淡黄 | 亮黄、黄绿、棕 | 黄 | 亮黄、黄绿、绿 | 黄 | 黄、黄棕、暗蓝 | |||
异黄酮 | 无色 | 淡黄、紫 | 无色 | 淡黄、紫 | 无色 | 淡绿 | |||
儿茶精 | 无色 | 无色 | 无色 | 淡蓝黑 | 无色 | ||||
二氢黄酮 | 无色 | 无色** | 无色 | 无色、淡黄、淡绿 | 无色 | 淡黄、绿 | |||
花色甙 | 红、橙紫 | 深红、橙紫、淡棕 | 蓝 | 暗蓝 | |||||
查耳酮 | 黄 | 棕、黑、黄棕 | 黄、橙、红 | 橙、红、紫黑 | 黄、橙 | 橙*、棕、红 | 橙、蓝红 |
11.有机酸
(1)溴酚蓝试验:取检品的酸性乙醇溶液点于滤纸,干后,喷雾0.1%溴酚蓝乙醇溶液(70%乙醇),立即在蓝色背景中显黄色斑点。如不明显,可喷雾氨水,然后暴露在盐酸气体中,背景逐渐由蓝色变为黄色,而有机酸的斑点仍然为蓝色。
(2)酸碱度试验:取检品液(水提取液)以pH试纸检查,如试纸颜色指示pH在7以下,可能含有有机酸。
(3)纸层析检出试验:见纸层析操作方法。
①支持剂:新华滤纸(中速)
②展开剂:正丁醇:醋酸:水(4:1:5)。
③显色剂:0.15溴酚蓝乙醇溶液(70%乙醇)。
结果:呈现蓝色斑点。
12.挥发渍及油脂
(1)取检品的乙醚溶液,置蒸发皿中,待溶剂挥发生,残渣为油状物,并有香气或特异自气,加热,油状物减少或消失示含挥发油。如无香气,或加状物不减少,可能为油脂,可于残渣中加入少许无水硫酸钠颗粒,直火加热,如产生气泡,并有剌激性特臭的浓白色气体(丙烯醛),示含油脂类化合物。
(2)取检品的乙醚溶液,点在滤纸上,待溶剂挥发生,喷雾0.05%荧光素钠溶液,再将滤纸下置碘蒸气上,熏几分钟,产生黄或黄绿色斑点,背景为粉红色示含挥发油。
(3)取检品的乙醇溶液,置白瓷皿中,待溶剂挥发生,残渣中加1%香草醛盐酸液,显黄色、红、棕、蓝、紫等颜色,示含挥发油。
(4)挥发油薄层微量检出反应:
①吸附剂:硅胶G(湿法制板);中性氧化铝:石膏:水(5:1:7)。
②展开剂:正已烷:乙酸乙酯(85:15);石油醚:乙酸乙酯(85:15)。
③显色剂:含5%香草醛的浓硫酸液(临用新配)105。烘2-10分钟;荧光照射;浓硫酸。
【注】香草醛化学名为3甲氧基4羟基苯甲醛。