第七章 色谱法
第一节 概述
色谱法:是一种物理或物理化学分离方法。用于定性鉴别、纯度检查、含量测定。
分配系数:组分在固定相和流动相之间的分配平衡时的浓度之比。 K=
容量因子:又称质量分配系数,即达到分配平衡后,组分在固定相和流动相中的质量之比。
第二节 薄层分析法
一般指吸附薄层色谱法,固定相为吸附剂的薄层吸附法。K值越大随展开剂移动的速度越慢。
比移徝:在薄层色谱法中,组分的迁移距离( )与展开剂的迁移距离( )之比称为比移值( ) .
R 最佳范围是0.3-0.5 ,可用范围是0.2-0.8 .
吸附剂:吸附薄层色谱法的固定相。常用吸附剂有:硅胶、氧化铝、硅藻土、纤维素和聚酰胺。
硅胶:在105-110 C加热30分,使硅胶吸附力增加,称为活化。具微酸性,适分离酸性中性物质。
氧化铝:碱性、中性、酸性。中性用得多。
制备薄层板:要求吸附剂涂布均匀表面光滑,使用前检查均匀度。2000版用机械涂布法。活化。
吸附剂与展开剂的选择:分离极性较强的组分时,宜选用活性低(活度级别高)的薄层板,以极性强的展开剂展开。反之
点样:体积宜在20ul 以下,样径不超过2-3mm ,点间距离为1.5-2.0cm,距底2.0cm .
显色方法:直接喷雾法、浸渍法、压板法。
定性分析方法、纯度检查、定量分析方法(洗脱测定法和直接测定法)。
第三节 气相色谱法
气相色谱法:以气体为流动相的色谱法称为气相色谱法。不适用于难挥发和热稳定性差的物质分析。
原理:各组分在固定相与载气(流动相)间分配系数不等,按大小依次被载气带出色谱柱,小先流出。
一、基本原理:
(一)基本概念:
一个组分的色谱峰用三项参数:峰高或峰面积(用于定量)、峰位(用保留值表示,用于定性)、峰宽(用于衡量柱效)。
(1)保留时间 (tR) :从进样开始到某个组分的色谱峰顶点的时间间隔。
(2)死时间 (t0):分配系数为零的组分的保留时间。
(3)相对保留值 (r):两组分的调整保留值之比。
(4)半峰宽 (Wh/2):峰高一半处的峰宽。